人外周血淋巴細(xì)胞分離液教你如何檢驗(yàn)
更新時(shí)間:2016-08-08 1316
質(zhì)量是企業(yè)的生命線(xiàn),本公司歡迎您的咨詢(xún).人外周血淋巴細(xì)胞分離液檢驗(yàn)方法,使用 15ml 離心管時(shí):情況 A:血液樣本量小于 3ml 時(shí),實(shí)驗(yàn)方法如下:取一支 15ml 離心管,加入 3ml 分離液。用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上,400-650g,離心 20-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件需客戶(hù)自行摸索,以達(dá)到*分離效果)。離心后,此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層到另一 15ml 離心管中,向所得離心管中加入 10ml 清洗液(產(chǎn)品編號(hào):2010X1118),混勻細(xì)胞。250g,離心 10min。棄上清。用吸管以 5ml 清洗液(產(chǎn)品編號(hào):2010X1118)重懸所得細(xì)胞。250g,離心 10min。
人外周血淋巴細(xì)胞分離液全過(guò)程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得*的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在取血 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),血液存放時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過(guò) 6h后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。本實(shí)驗(yàn)不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無(wú)靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過(guò)后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。
人外周血淋巴細(xì)胞分離液吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。吸取過(guò)多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過(guò)低,請(qǐng)上海易佰聚經(jīng)貿(mào)有限公司以尋求幫助,具體,請(qǐng)參考本.