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所需材料（不提供）
1、實(shí)驗(yàn)室用蒸餾水或去離子水
2、100ml量筒
3、用于萃取樣品及收集萃取液玻璃器皿
4、濾紙，Whatman NO.4及相當(dāng)者
5、可以吸取500ul溶液的吸管及一次性吸頭
6、吸水紙
7、450nm的酶標(biāo)儀
8、計(jì)時(shí)器
樣品的準(zhǔn)備
1、粉碎好的樣品過20目篩并與先前取樣*混合，不立即使用分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存
2、稱取20g樣品，量取100ml水到一有蓋容器中，所用的容器使用前應(yīng)是封閉良好的
3、劇烈震蕩3分鐘
4、靜置2-3分鐘，使樣品沉淀
5、用Whatman1＃玻璃纖維濾紙過濾15ml萃取液，收集濾液到一干凈容器中
清洗液的準(zhǔn)備
1、將清洗濃縮倒入1L溶積的容器中，加入實(shí)驗(yàn)室用蒸餾水。
2、將配好的清洗液轉(zhuǎn)移至洗瓶中
檢測程序（注意標(biāo)準(zhǔn)及樣品做重復(fù)，可以提高檢測的準(zhǔn)確度及度）
1、開始實(shí)驗(yàn)前要求試劑及樣品萃取液達(dá)到室溫
2、取適量的測試管固定在測試管架上，確定末使細(xì)胞分離液用的測試管，與干燥劑一同放入密封袋中保存。
3、加入500ul的樣品及標(biāo)準(zhǔn)品到相應(yīng)的測試管中，注意使用一次性吸頭止交叉污染
4、加入500ul的酶標(biāo)記物到測試管中
5、室溫下孵育10分鐘
6、倒掉微孔中溶液，測試孔中注滿清洗液，然后到掉，重復(fù)4次，共五次洗板
7、zui后一次清洗完后，倒掉孔中溶液，然后翻轉(zhuǎn)測試孔板在吸水紙上拍干
8、每個(gè)測試fermentas管中加入500ul的底物溶液
9、室溫下孵育5分鐘
10、每個(gè)測試管中加入500ul停止液
11、450nm讀吸光度值
結(jié)果判斷
1、半定時(shí)結(jié)果的判定，可根據(jù)樣品的吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值來判定，樣品的吸光度值低于某個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值，則說明樣品的

DON含量大于此標(biāo)準(zhǔn)的NON濃度，樣品的吸光度值高于某個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值，則說明樣品的DON含量小于此標(biāo)準(zhǔn)的DON濃度
2、定量結(jié)果判定，需要以標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值為X軸，標(biāo)準(zhǔn)濃度的半對數(shù)為Y軸給制曲線圖，將標(biāo)準(zhǔn)濃度抗體及吸光度值的點(diǎn)用直線連接，根

據(jù)樣品的吸光度值在Y軸上即可找到相應(yīng)樣品的濃度，如果樣品的吸光度值大于zui大標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值或小于zui小樣品的吸光度值，即

可說明此樣品中DON的含量大于6ppm或小于0.5ppm。另外，也可應(yīng)用Beacon公司提供的Excel軟件來計(jì)算